心脏原位巨噬细胞抑制心肌细胞凋亡减轻阿霉素心脏毒性

摘要

目的 探讨心脏原位巨噬细胞在阿霉素诱导的心脏毒性中的作用及其机制。方法 利用巨噬细胞特异性Cre工具鼠(Cx3cr1^CreER-YFP)与双重转基因小鼠(R26^tdTomato/DTR)进行杂交，构建心脏原位巨噬细胞敲除小鼠，采用尾静脉注射低剂量（5mg/kg）阿霉素诱导慢性心脏损伤模型。将9周龄小鼠随机分为盐溶液+PBS、盐溶液+白喉毒素、阿霉素+PBS、阿霉素+白喉毒素4组，每组各8只。阿霉素心肌病造模7周后，应用超声心动图测定各组小鼠左心室射血分数（LVEF）和左心室短轴缩短率（FS），采用Masson染色检测小鼠心肌组织的纤维化程度（以定量胶原纤维百分比评估），采用TUNEL染色检测凋亡的心肌细胞数量，采用蛋白质免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bax、Cleaved-caspase 9，以及抗凋亡相关蛋白Bcl-2、Bcl-xl的蛋白质相对表达量。结果 超声心动图检测结果显示，阿霉素+PBS组小鼠的LVEF和FS分别为（58.06±5.07）%和（30.55±3.49）%，均显著低于盐溶液+PBS组的（70.89±3.61）%和（39.53±2.95）%（P值均<0.01），均显著高于阿霉素+白喉毒素组的（40.59±3.83）%和（20.00±2.27）%（P值均<0.01）。Masson染色结果显示，阿霉素+PBS组小鼠心肌组织的纤维化程度为（11.51±1.34）%，显著高于盐溶液+PBS组的（2.00±0.20）%（P<0.01），显著低于阿霉素+白喉毒素组的（15.60±1.59）%（P<0.01）。TUNEL染色结果显示，阿霉素+PBS组小鼠凋亡的心肌细胞数量为（17.73±1.57）个/高倍视野，显著多于盐溶液+PBS组的（5.15±0.65）个/高倍视野（P<0.01），显著低于阿霉素+白喉毒素组的（21.04±1.78）个/高倍视野（P<0.01）。蛋白质免疫印迹法检测结果显示，阿霉素+PBS组小鼠的Bax、Cleaved-caspase 9蛋白质相对表达量分别为2.96±0.52、1.88±0.17，均显著高于盐溶液+PBS组的1.00±0.35、1.00±0.11（P值均<0.01），均显著低于阿霉素+白喉毒素组的4.82±0.31、2.79±0.35（P值均<0.01）;Bcl-2、Bcl-xl蛋白质相对表达量分别为0.50±0.06、0.48±0.06，均显著低于盐溶液+PBS组的1.00±0.09、1.00±0.13（P值均<0.01），均显著高于阿霉素+白喉毒素组小鼠的0.22±0.05、0.31±0.08（P<0.01或0.05）。结论 心脏原位巨噬细胞可以通过抑制心肌细胞的凋亡来减轻阿霉素诱导的心脏毒性。

关键词

心脏原位巨噬细胞 / 阿霉素心肌病 / 心脏修复 / 细胞凋亡

基金资助

国家自然科学基金（82300292）