PKM2通过调控活性氧依赖的PI3K/Akt信号通路影响膀胱尿路上皮细胞癌细胞的侵袭能力

摘要

目的 探讨PKM2通过调控活性氧（ROS）依赖的PI3K/Akt信号通路对膀胱尿路上皮细胞癌细胞侵袭能力的影响。方法 将人膀胱癌T24细胞随机分为Control组、si-NC组、si-PKM2组和si-PKM2+IGF-1组。实时PCR检测细胞中PKM2 mRNA表达；CCK-8检测细胞增殖；Transwell小室法检测细胞侵袭和转移；Hoechst 33342荧光染色和流式细胞术检测细胞凋亡；ROS荧光探针法检测细胞中ROS水平；Western blotting检测细胞中PI3K、Akt、mTOR、caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果 与人正常膀胱上皮SV-HUC-1细胞相比，人膀胱癌T24细胞中PKM2 mRNA相对表达量明显增加（P <0.05）。与Control组相比，si-PKM2组T24细胞中PKM2 mRNA相对表达量、细胞增殖能力、侵袭细胞数以及细胞中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR比值和Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P <0.05），细胞凋亡率、细胞中ROS相对水平以及细胞中Bax、caspase-3蛋白表达水平明显升高（P <0.05）；与siPKM2组相比，si-PKM2+IGF-1组T24细胞中PKM2 mRNA相对表达量、细胞增殖能力、侵袭细胞数以及细胞中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR比值和Bcl-2蛋白表达水平明显升高（P <0.05），细胞凋亡率、细胞中ROS相对水平以及细胞中Bax、caspase-3蛋白表达水平明显降低（P <0.05）。结论 敲减PKM2可促进膀胱尿路上皮细胞癌细胞中ROS水平升高，抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路激活，进而发挥抑制细胞侵袭和促进细胞凋亡作用。

关键词

M2型丙酮酸激酶 / 膀胱尿路上皮细胞癌 / 活性氧 / PI3K/Akt/mTOR信号通路