KRT6A介导Wnt/β-catenin信号通路调节上皮-间质转化促进非小细胞肺癌A549细胞抗辐射

摘要

目的 探讨KRT6A对非小细胞肺癌A549细胞抗辐射的促进作用，并阐明其作用机制。方法 诱导并建立抗辐射A549(A549-RR)细胞，通过CCK-8法、平板克隆形成实验和流式细胞术验证细胞构建成功。Western blotting检测A549和A549-RR细胞中KRT6A表达情况。将A549-RR细胞分为敲减对照组（sh-NC组）和敲减KRT6A组（sh-KRT6A组），Western blotting检测KRT6A、上皮-间质转化（EMT）相关蛋白（E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Snail和Slug）以及β-catenin的表达；采用CCK-8法、平板克隆形成实验和流式细胞术检测细胞增殖及凋亡情况。将A549-RR细胞分为sh-NC组、sh-KRT6A组、敲减KRT6A和过表达对照（shKRT6A+ov-NC组）以及敲减KRT6A和过表达β-catenin (sh-KRT6A+ov-β-catenin组)，Western blotting检测β-catenin以及EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Snail和Slug的表达；采用CCK-8法、平板克隆形成实验和流式细胞术检测细胞增殖及凋亡情况。结果 成功建立了A549-RR细胞，A549-RR细胞中KRT6A表达上调。敲减KRT6A降低A549-RR细胞增殖活性和克隆形成能力，增加细胞凋亡率，上调E-cadherin蛋白表达并下调N-cadherin、Vimentin、Snail、Slug和β-catenin蛋白表达；过表达β-catenin可逆转此作用。结论 KRT6A在A549-RR细胞中表达上调，敲减KRT6A可降低A549-RR细胞的抗辐射能力，其机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路诱导的EMT有关。

关键词

非小细胞肺癌 / 角蛋白6A / 放疗 / 上皮-间质转化 / Wnt/β-catenin信号通路