NKX2-1-AS1介导miR-96-5p/PRDM16轴对未分化甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

摘要

目的 探讨长链非编码RNA (lncRNA) NK2同源异形盒1-反义RNA 1 (NKX2-1-AS1)介导微RNA (miR)-96-5p/含有PR结构域的蛋白16 (PRDM16)轴对未分化甲状腺癌（ATC）细胞体外增殖、迁移和侵袭以及体内移植瘤生长的影响。方法 基于生物信息学筛选ATC组织及细胞中差异表达的lncRNA NKX2-1-AS1，并进一步筛选其靶基因miR-96-5p和下游靶基因PRDM16。双荧光素酶报告基因实验验证NKX2-1-AS1与miR-96-5p以及miR-96-5p与PRDM16之间的关系。Western blotting检测过表达miR-96-5p对NKX2-1-AS1过表达的CAL-62细胞PRDM16表达的影响。平板克隆形成实验、划痕实验和Transwell实验分别检测敲减PRDM16对过表达NKX2-1-AS1的CAL-62细胞增殖、迁移和侵袭的影响。裸鼠皮下注射CAL-62细胞，观察敲减PRDM16对NKX2-1-AS1过表达的CAL-62细胞移植瘤生长的影响。结果 基于生物信息学筛选出参与调节ATC发展的NKX2-1-AS1/miR-96-5p/PRDM16轴。双荧光素酶报告基因实验验证结果显示NKX2-1-AS1与miR-96-5p、miR-96-5p与PRDM16结合。过表达NKX2-1-AS1上调CAL-62细胞中PRDM16蛋白表达；而过表达miR-96-5p可逆转此上调作用。过表达NKX2-1-AS1抑制CAL-62细胞体外增殖、迁移和侵袭以及体内移植瘤生长；而敲减PRDM16可逆转此抑制作用。结论 NKX2-1-AS1可能作为竞争性内源性RNA与miR-96-5p竞争结合下游靶基因PRDM16，上调PRDM16表达，从而抑制ATC细胞体外增殖、迁移和侵袭以及体内移植瘤生长。

关键词

NKX2-1-AS1 / miR-96-5p / PRDM16 / 未分化甲状腺癌