转录因子MYB激活CTSF通过谷氨酰胺代谢影响胃癌细胞增殖和细胞干性

摘要

目的 探讨转录因子MYB激活组织蛋白酶F (CTSF)通过谷氨酰胺代谢对胃癌细胞增殖和干性的影响及其作用机制。方法 通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析CTSF在胃癌组织中的表达，KnockTF数据库预测CTSF上游转录因子MYB，分析MYB在胃癌组织中的表达，双荧光素酶和染色质免疫沉淀(ChIP)实验验证二者的结合关系。实时荧光定量PCR检测CTSF和MYB在胃癌细胞中的表达。CCK-8法和平板克隆形成实验检测细胞增殖。成球实验检测细胞成球能力。Western blotting检测干细胞表面标志物OCT4、NANOG、SOX2及谷氨酰胺转运蛋白SLC1A5的表达。检测谷氨酰胺摄取、谷氨酸含量、α-酮戊二酸含量、NADPH/NADP+比值、GSH/GSSG比值、天冬氨酸水平和草酰乙酸水平。结果 CTSF在胃癌组织和细胞中低表达，过表达CTSF可以抑制胃癌细胞增殖和干性。敲低CTSF显著增加胃癌细胞中谷氨酰胺、谷氨酸和α-酮戊二酸含量、NADPH/NADP+比值、GSH/GSSG比值以及天冬氨酸和草酰乙酸水平，促进胃癌细胞增殖和干性。MYB在胃癌组织和细胞中高表达。生物信息学预测结合ChIP和双荧光素酶实验证实MYB是调控CTSF基因的转录因子。结论 本研究结果表明，转录因子MYB激活CTSF通过谷氨酰胺代谢促进胃癌细胞增殖和干性。

关键词

MYB / 组织蛋白酶F / 谷氨酰胺代谢 / 胃癌 / 细胞干性