延胡索通过靶向CXCL17激活AMPK信号通路下调PD-L1抑制EB病毒感染诱导的胃癌免疫逃逸

摘要

目的 探讨延胡索对EB病毒(EBV)阳性胃癌细胞免疫逃逸的作用及其靶向CXCL17影响EBV阳性胃癌细胞免疫逃逸的机制。方法 GEO2R在线分析软件筛选EBV阳性胃癌组织中的差异表达基因。采用EBV阴性胃癌AGS细胞和EBV阳性胃癌SUN-719细胞进行实验。实时q PCR和Western blotting检测EBV阴性和EBV阳性胃癌细胞中CXCL17表达。将CXCL17 siRNA转染EBV阳性胃癌细胞，Western blotting检测细胞PD-L1表达；将EBV阳性胃癌细胞与T细胞共培养，CCK-8检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡率。用延胡索提取物(2、4、8μg/m L)处理EBV阳性胃癌细胞，Western blotting检测细胞CXCL17和PD-L1表达；将EBV阳性胃癌细胞与T细胞共培养，CCK-8检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡率。将CXCL17过表达质粒转染延胡索提取物(8μg/m L)处理的EBV阳性胃癌细胞，Western blotting检测细胞PD-L1和p-AMPK表达；将EBV阳性胃癌细胞与T细胞共培养，CCK-8检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 CXCL17在EBV阳性胃癌组织和细胞中表达上调(P <0.05)。沉默CXCL17降低EBV阳性胃癌细胞PD-L1表达，抑制与T细胞共培养的EBV阳性胃癌细胞增殖并促进细胞凋亡(P <0.05)。延胡索处理降低EBV阳性胃癌细胞CXCL17和PD-L1表达，抑制与T细胞共培养的EBV阳性胃癌细胞增殖并促进细胞凋亡(P <0.05)；过表达CXCL17逆转了延胡索处理对EBV阳性胃癌细胞PD-L1表达和细胞增殖的抑制作用及细胞凋亡的促进作用(P <0.05)；过表达CXCL17还降低了延胡索处理的EBV阳性胃癌细胞p-AMPK表达(P <0.05)。结论 CXCL17在EBV阳性胃癌细胞中表达上调，延胡索通过下调EBV阳性胃癌细胞CXCL17表达抑制胃癌细胞免疫逃逸，其机制可能与激活AMPK信号通路有关。

关键词

延胡索 / 胃癌 / EB病毒 / 免疫逃逸 / CXCL17 / AMPK信号通路