YAP调控Notch信号通路影响小鼠NASH肝纤维化的机制及慈菇消脂方的干预作用

摘要

目的 探讨Yes相关蛋白(YAP)调控Notch信号通路影响非酒精性脂肪性肝炎(NASH)肝纤维化的机制及解毒化痰法中药慈菇消脂方的干预作用。方法 将小鼠随机分为正常组、NASH肝纤维化模型组、维替泊芬(VP)组、VP+中药低剂量组、VP+中药高剂量组和DMSO对照组。采用蛋氨酸-胆碱缺乏(MCD)饮食联合小剂量CCl4建立小鼠NASH相关肝纤维化模型，采用HE、Masson染色观察肝脏纤维化程度，ELISA法检测肝纤维化四项，碱水法测定小鼠肝脏中羟脯氨酸含量，免疫组织化学法检测α-SMA、ColⅠ、YAP、Notch1蛋白在肝脏中的定位，Western blotting及实时定量PCR检测Notch信号通路中Notch1/2、Jagged1和DLL4蛋白及mRNA表达。结果 NASH肝纤维化组小鼠肝细胞肿胀、胞质透明，肝小叶、门管区以及窦周均存在明显纤维化，并伴有大量炎症细胞浸润及多量脂肪小滴，局部出现肝细胞坏死、溶解以及肝硬化；肝纤维化四项指标显著升高(P <0.01)；肝细胞中α-SMA、ColⅠ、YAP以及Notch1定位于细胞质中；肝脏中YAP、Notch1/2及Jagged1均呈高表达(P <0.01)。经VP及VP联合高、低剂量中药慈菇消脂方分别干预后，小鼠肝脏中YAP、Notch1/2及Jagged1均呈低表达(P <0.05),DLL4因子在VP联合中药高剂量组上调(P <0.05)。结论 YAP可能通过下调Notch1/2、Jagged1及上调DLL4，抑制Notch通路活化，干预NASH肝纤维化发生。中药慈菇消脂方通过多成分、多靶点下调YAP、Notch1/2、Jagged1、上调DLL4，抑制Notch信号通路活化，改善NASH肝纤维化进展。

关键词

非酒精性脂肪性肝炎肝纤维化 / Yes相关蛋白 / Notch信号通路 / 慈菇消脂方