circLRP6调节miR-31-5p/HMGA1轴对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响

摘要

目的 分析circLRP6调节miR-31-5p/高迁移率族蛋白A1 (HMGA1)轴对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响。方法体外培养人肾小管上皮HK-2细胞，分为对照组、高糖组、高糖+si-NC组、高糖+si-circLRP6组、高糖+si-circLRP6+miR-NC组、高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor组、高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor+si-NC组、高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor+si-HMGA1组，对照组置于含5.5 mmol/L葡萄糖的DMEM培养基内培养，其余各组置于含25 mmol/L葡萄糖的DMEM培养基内培养，并通过Lipofectamine 2000将相应质粒转染至HK-2细胞内，实时定量PCR测定细胞circLRP6、miR-31-5p、HMGA1 mRNA水平，试剂盒测定细胞上清液白细胞介素-6 (IL-6)水平、肿瘤坏死因子α (TNF-α)水平、乳酸脱氢酶（LDH）活性以及丙二醛（MDA）含量；流式细胞仪观察细胞凋亡；Western blotting测定细胞HMGA1、Bax、Bcl-2蛋白表达；双荧光素酶报告基因实验分析miR-31-5p与circLRP6、HMGA1的靶向关系。结果 与对照组相比，高糖组HK-2细胞circLRP6水平升高，细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达升高，Bcl-2蛋白表达降低（均P <0.05）；与高糖组相比，高糖+si-circLRP6组HK-2细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达降低，Bcl-2蛋白表达升高（均P <0.05）；与高糖+si-circLRP6组相比，高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor组HK-2细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达升高，Bcl-2蛋白表达降低（均P <0.05）；与高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor组相比，高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor+si-HMGA1组HK-2细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达降低，Bcl-2蛋白表达升高（均P <0.05）。miR-31-5p与circLRP6、HMGA1均具有靶向关系。结论 沉默circLRP6可能通过上调miR-31-5p，抑制HMGA1表达，对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤发挥保护作用。

关键词

高糖 / 肾小管 / circLRP6 / miR-31-5p / 高迁移率族蛋白A1