褪黑素对人腹膜间皮细胞上皮-间质转化的作用及机制

摘要

目的 探讨褪黑素对人腹膜间皮细胞上皮-间质转化（EMT）的作用及机制。方法 培养人腹膜间皮细胞株HMrSV5，构建核心蛋白聚糖（DCN）过表达和敲减质粒。将细胞分为正常对照组、TGF-β1组、TGF-β1+褪黑素组、TGF-β1+褪黑素+siDCN组、TGF-β1+褪黑素+siNC组、TGF-β1+DCN组。采用CCK-8法检测细胞增殖存活率；采用蛋白免疫印迹和实时定量PCR检测DCN、TGF-β1、Smad2、E-cadherin蛋白和mRNA表达水平。结果 CCK-8结果显示，TGF-β1+褪黑素组、TGF-β1+褪黑素+siDCN组、TGF-β1+DCN组细胞存活率均较TGF-β1组高，TGF-β1+褪黑素组较TGF-β1+褪黑素+siDCN组细胞存活率更高（均P <0.05）。蛋白免疫印迹及实时定量PCR表明，TGF-β1组较对照组DCN和E-cadherin表达明显下调，TGF-β1+褪黑素组与TGF-β1+褪黑素+siDCN组较TGF-β1组DCN、E-cadherin蛋白及mRNA表达上调，TGF-β1、Smad2蛋白及m RNA表达下调；TGF-β1+褪黑素组较TGF-β1+褪黑素+siDCN组进一步上调E-cadherin、DCN蛋白及mRNA表达，进一步下调TGF-β1、Smad2蛋白及m RNA表达（均P <0.05）。结论褪黑素可延缓人腹膜间皮细胞EMT进程，DCN基因可能是抑制该细胞发生EMT的一个重要靶点。

关键词

褪黑素 / 人腹膜间皮细胞 / 核心蛋白聚糖 / 上皮-间质转化