水飞蓟素通过调控miR-124-3p/WEE1轴影响胶质瘤细胞恶性生长的机制研究

摘要

目的 探讨水飞蓟素（SM）对胶质瘤细胞恶性生长的影响以及对miR-124-3p/WEE1轴的调控机制。方法 将胶质瘤U87细胞分为对照组，SM低、中、高浓度组，SM高浓度+miR-124-3p抑制剂组（SM高+miR-124-3p inhibitor组）。采用CCK-8法检测细胞增殖活性，Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力，流式细胞术检测细胞周期变化，Western blotting检测细胞中细胞周期蛋白D1（cyclin D1）及凋亡相关蛋白的表达，实时定量PCR检测细胞中miR-124-3p和WEE1 mRNA水平，荧光素酶活性实验验证miR-124-3p和WEE1之间的靶向关系，建立NOD/SCID小鼠颅内移植瘤模型并进行给药和分析。结果 与对照组比较，不同浓度SM处理组的细胞增殖活性、迁移和侵袭细胞数、cyclin D1蛋白表达、WEE1 mRNA表达水平降低，G₀/G₁周期细胞数、cleaved caspase-8、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3及miR-124-3p表达升高（P <0.05）；进一步转染miR-124-3p inhibitor后发现，SM对胶质瘤细胞恶性行为的抑制作用被逆转。小鼠体内实验显示，SM处理组肿瘤的质量和体积均低于模型组（P <0.05），且小鼠体质量无显著变化（P> 0.05）。结论 SM可通过上调miR-124-3p靶向下调WEE1抑制胶质瘤细胞的恶性生长。

关键词

水飞蓟素 / 胶质瘤 / miR-124-3p/WEE1轴 / 恶性生长