当归多糖调控AMPK/NLRP3通路介导的细胞焦亡对脓毒症大鼠肠道损伤的改善作用

摘要

目的 探讨当归多糖（ASP）调控单磷酸腺苷活化蛋白激酶（AMPK）/Nod样受体蛋白3 (NLRP3)通路介导的细胞焦亡对脓毒症大鼠肠道损伤的改善作用。方法 以盲肠结扎穿孔术复制脓毒症大鼠模型，将造模成功的大鼠分为模型（Model）组、ASP低、中、高剂量（ASP-L、ASP-M、ASP-H）组和抑制剂（AMPK抑制剂）组，每组12只，选择同期12只未行盲肠结扎的大鼠作为假手术（Sham）组。HE染色观察大鼠小肠病理学变化并进行病理评分；TUNEL染色检测肠道细胞焦亡；免疫组织化学染色检测小肠组织中NLRP3的表达；ELISA法检测血清白细胞介素（IL）-18、IL-1β水平及小肠组织中D-氨基酸氧化酶（DAO）、肠脂肪酸结合蛋白（iFABP）活性；Western blotting检测小肠组织中消皮素D (GSDMD)、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、剪切的胱天蛋白酶-1(cleaved caspase-1)及p-AMPK/AMPK蛋白表达。结果 相较于Sham组，Model组小肠组织Chiu评分、细胞焦亡率、NLRP3、DAO、i FABP、GSDMD、ASC、cleaved caspase-1及血清IL-18、IL-1β表达升高，p-AMPK/AMPK表达降低（P <0.05）；相较于Model组，ASP-L、ASP-M、ASP-H组小肠组织Chiu评分、细胞焦亡率、NLRP3、DAO、iFABP、GSDMD、ASC、cleaved caspase-1及血清IL-18、IL-1β表达降低，p-AMPK/AMPK表达升高（P <0.05）;AMPK抑制剂可减弱ASP对小肠组织细胞焦亡的抑制作用，加重肠道损伤（P <0.05）。结论 ASP可通过活化AMPK阻碍NLRP3炎症小体的激活，进而抑制细胞焦亡，减轻脓毒症大鼠肠道损伤。

关键词

当归多糖 / AMPK/NLRP3通路 / 细胞焦亡 / 脓毒症 / 肠道损伤