芹菜素通过miR-181a-5p/SOCS3信号通路调节Treg/Th17细胞平衡减轻类风湿关节炎进展

摘要

目的 探讨芹菜素调节miR-181a-5p/SOCS3信号通路对类风湿关节炎大鼠关节炎的影响及其可能的作用机制。方法 将Wistar大鼠随机分为对照组、模型组[胶原诱导性关节炎（CIA）组]、芹菜素组（API组）、芹菜素+敲减对照组（API+sh-NC组）和芹菜素+敲减SOCS3组（API+sh-SOCS3组）。CIA组、API组、API+sh-NC组和API+sh-SOCS3组大鼠注射乳化剂制备CIA模型，对照组同时间注射等量的生理盐水。采用关节炎指数评分评价各组大鼠关节炎症情况；采用HE染色比较各组大鼠关节滑膜病理损伤情况；采用ELISA检测各组大鼠血清中Th17相关细胞因子白细胞介素（IL）-17A和IL-6以及Treg相关细胞因子肿瘤坏死因子（TGF）-β和IL-10水平；流式细胞术检测大鼠脾细胞中Th17细胞（CD4⁺IL-17A⁺）和Treg细胞(CD25⁺Foxp³⁺)的细胞比例。采用RT-qPCR和Western blotting检测大鼠滑膜组织中miR-181a-5p和SOCS3表达情况。双萤光素酶报告基因实验验证miR-181a-5p与SOCS3之间的结合关系。结果 与对照组比较，CIA组大鼠足部肿胀程度和踝关节滑膜病理损伤加重，关节炎指数评分、血清中IL-17A和IL-6水平以及脾细胞中CD4⁺IL-17A⁺细胞数明显升高，血清中TGF-β和IL-10水平以及脾细胞中CD25⁺Foxp³⁺细胞数明显降低（均P <0.05）；与CIA组比较，API组和API+sh-NC组大鼠足部肿胀程度和踝关节滑膜病理损伤改善，关节炎指数评分、血清中IL-17A和IL-6水平以及脾细胞中CD4⁺IL-17A⁺细胞数明显降低，血清中TGF-β和IL-10水平以及脾细胞中CD25⁺Foxp³⁺细胞数明显升高（均P <0.05）；与API组和API+sh-NC组比较，API+sh-SOCS3组大鼠足部肿胀程度和踝关节滑膜病理损伤加重，关节炎指数评分、血清中IL-17A和IL-6水平以及脾细胞中CD4⁺IL-17A⁺细胞数明显升高，血清中TGF-β和IL-10水平以及脾细胞中CD25⁺Foxp³⁺细胞数明显降低（P <0.05）。与对照组比较，CIA组大鼠滑膜组织中miR-181a-5p表达明显升高，SOCS3 mRNA和蛋白表达明显降低（均P <0.05）。与CIA组比较，API组大鼠滑膜组织中miR-181a-5p表达明显降低，SOCS3 mRNA和蛋白表达明显升高（均P <0.05）。与mimics NC组比较，miR-181a-5p mimics组转染SOCS3-WT的HEK-293T细胞相对萤光素酶活性明显降低（P <0.05），而转染SOCS3-MUT的HEK-293T细胞相对萤光素酶活性无明显差异（P> 0.05）。结论 芹菜素通过下调miR-181a-5p表达上调其下游靶基因SOCS3表达来改善类风湿关节炎中Treg/Th17细胞失衡状态，从而改善类风湿关节炎诱导的关节损伤。

关键词

芹菜素 / 类风湿关节炎 / Treg/Th17细胞平衡 / miR-181a-5p/SOCS3信号通路