LINC01355通过miR-545-5p/FOXD1信号通路对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

摘要

目的 探讨LINC01355通过miR-545-5p/叉头盒D1 (FOXD1)信号通路对口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 体外培养人OSCC细胞系Cal-27，随机分为对照组、转染LINC01355 siRNA (si-LINC01355)组、转染LINC01355过表达质粒（pc-LINC01355）组、转染LINC01355 siRNA阴性对照+miR-545-5p阴性对照+空载质粒（si-NC+miR-545-5p-NC+pc-NC）组、转染LINC01355 siRNA+miR-545-5p抑制剂（si-LINC01355+miR-545-5p inhibitor）组。转染后实时定量PCR检测各组细胞LINC01355、miR-545-5p及FOXD1表达；转染后的Cal-27细胞通过皮下接种构建各组移植瘤裸鼠模型，测量移植瘤生长情况；CCK-8法、流式细胞术、Transwell实验分别检测各组细胞增殖、凋亡和侵袭情况；免疫组织化学染色检测细胞上皮-间质转化（EMT）相关蛋白Vimentin、E-cadherin表达；Western blotting检测细胞增殖相关蛋白[增殖细胞核抗原（PCNA）、C-myc]、凋亡相关蛋白[切割型胱天蛋白酶-3 (cleaved caspase-3)、BCL-2相关X蛋白（Bax）]与FOXD1表达。双萤光素酶报告实验鉴定LINC01355与miR-545-5p/FOXD1信号通路的靶向关系。结果 与对照组比较，si-LINC01355组LINC01355、FOXD1 mRNA表达，增殖活性，侵袭数量，Vimentin蛋白阳性表达，PCNA、C-myc与FOXD1蛋白表达，移植瘤体积均降低（均P <0.05）；而miR-545-5p表达，细胞凋亡率，cleaved caspase-3、Bax蛋白表达，E-cadherin蛋白阳性表达均升高（均P <0.05）。pc-LINC01355组各指标变化趋势与si-LINC01355组相反。与siLINC01355组比较，si-LINC01355+miR-545-5p inhibitor组LINC01355、FOXD1 mRNA表达，增殖活性，侵袭数量，Vimentin蛋白阳性表达，PCNA、C-myc与FOXD1蛋白表达，移植瘤体积均增加（均P <0.05），而miR-545-5p表达、细胞凋亡率、cleaved caspase-3与Bax蛋白表达、E-cadherin蛋白阳性表达均降低（均P <0.05）。Cal-27细胞中LINC01355可靶向下调miR-545-5p表达，且miR-545-5p可靶向下调FOXD1表达。结论 LINC01355可通过调控miR-545-5p/FOXD1信号通路促进OSCC细胞增殖和侵袭，抑制细胞凋亡。

关键词

口腔鳞状细胞癌 / LINC01355 / miR-545-5p/FOXD1信号通路 / 增殖 / 凋亡 / 侵袭