乳酸激活肿瘤相关巨噬细胞中SOX9-TRAF2信号通路促进结肠癌化疗耐药

摘要

目的 探讨乳酸（Lac）激活肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）中SOX9-TRAF2信号通路对结肠癌化疗耐药的影响。方法 采用梯度暴露法构建结肠癌耐药细胞系（SW480-R）。0、5、10、20 mmol/L Lac处理M0巨噬细胞，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞中人转化生长因子β (TGF-β)和精氨酸酶1 (Arg1)变化。0、20 mmol/L Lac处理M0巨噬细胞，或者联合敲减巨噬细胞中的SOX9，收集条件培养基（CM）(0 mmol/L Lac-CM、20 mmol/L Lac-CM、20 mmol/L Lac+si-SOX9-CM)处理SW480-R细胞，MTT检测细胞活力、Transwell检测细胞迁移、Western blotting检测SOX9蛋白表达。SW480-R细胞中SOX9敲减后测定TRAF2泛素化水平，并使用Western blotting检测TRAF2蛋白表达。构建体内移植瘤小鼠模型，使用5-FU与Lac干预，分析Lac对体内结肠癌化疗耐药的影响。结果 Lac干预M0巨噬细胞后细胞上清液中TGF-β和Arg1水平升高（均P <0.05）。与0 mmol/L Lac-CM组相比，20 mmol/L Lac-CM组SW480-R细胞活力与迁移能力增加，SOX9蛋白表达增加（均P <0.05）；敲减SOX9后部分逆转了Lac对SW480-R细胞生物学行为的影响。此外，SW480-R细胞中SOX9敲减后TRAF2泛素化水平增加，TRAF2蛋白表达减少（均P <0.05）。动物实验结果显示，5-FU能够抑制小鼠体内成瘤；联合Lac干预则抑制了5-FU的治疗作用。结论 Lac通过激活TAMs中的SOX9-TRAF2信号通路，促进结肠癌化疗耐药。

关键词

乳酸 / 肿瘤相关巨噬细胞 / SOX9-TRAF2信号通路 / 结肠癌 / 化疗耐药