加味补阳还五汤调节TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对少弱精子症大鼠锌稳态和生殖功能的影响

摘要

目的 探讨加味补阳还五汤（BYHWD）对少弱精子症（OAS）大鼠锌稳态和生殖功能的影响及其作用机制。方法 将60只雄性SD大鼠随机分为对照（control）组、OAS组、左卡尼汀（L-carnitine,0.323 g/kg）组、BYHWD低剂量（BYHWD-L,19.5 g/kg）组、BYHWD中剂量（BYHWD-M,39 g/kg）组、BYHWD高剂量（BYHWD-H,78 g/kg）组，每组10只。除control组外，其余各组大鼠均采取腺嘌呤灌胃给药构建OAS模型。模型构建成功后，各组大鼠均灌胃处理，给予对应剂量药物或生理盐水，1次/d，持续4周。记录各组大鼠一般情况，检测精子计数及活力；酶联免疫吸附试验（ELISA）测定各组血清睾酮（T）、雌二醇（E2）、促卵泡激素（FSH）、促黄体生成激素（LH）、催乳素（PRL）水平，睾丸组织白细胞介素-1β (IL-1β)、白细胞介素-6 (IL-6)、肿瘤坏死因子α (TNF-α)水平和含锌酶醇脱氢酶（ADH）、碱性磷酸酶（ALP）、乳酸脱氢酶（LDH）水平；测定睾丸组织锌含量；HE染色观察各组睾丸组织病理改变；免疫组织化学检测各组睾丸组织Toll样受体4 (TLR4)、髓样分化因子88 (MyD88)、核转录因子-κB (NF-κB)蛋白的表达。结果 与control组相比，OAS组大鼠精子活力、精子计数、血清T和E2水平均明显降低，FSH、LH、PRL水平均明显升高，睾丸组织锌含量以及含锌酶ADH、ALP、LDH水平均显著降低，IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著升高，TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达均显著升高（均P <0.05）；睾丸组织出现明显的病理损伤。与OAS组相比，各药物干预组大鼠精子活力、精子计数增加，血清T和E2水平升高，FSH、LH、PRL水平降低，睾丸组织锌含量以及含锌酶ADH、ALP、LDH水平升高，IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低，TLR4/MyD88/NF-κB信号通路蛋白表达减少（均P <0.05）；睾丸组织损伤程度减轻。结论 BYHWD能够改善OAS大鼠的生殖功能，其作用机制可能与调节锌稳态和TLR4/MyD88/NF-κB信号通路，降低炎症反应有关。

关键词

加味补阳还五汤 / 少弱精子症 / 锌稳态 / 生殖功能 / TLR4/MyD88/NF-κB信号通路