银杏黄酮苷介导NR4A2/p53/Bax通路调控自噬抑制心肌细胞凋亡

摘要

目的 探讨银杏黄酮苷减轻H9c2细胞损伤的作用机制。方法 将H9c2细胞分为5组：对照组、脂多糖（LPS）组、LPS+3-甲基腺嘌呤（3-MA，自噬抑制剂）组、LPS+银杏黄酮苷组和LPS+3-MA+银杏黄酮苷组。采用CCK-8法及细胞毒性检测法检测细胞活力以及细胞毒性，免疫荧光染色检测LC3表达，细胞自噬染色（MDC）检测各组心肌细胞自噬小体形成情况，流式细胞术检测细胞凋亡率，实时定量PCR检测NR4A2/p53/Bax通路表达，Western blotting检测NR4A2、p53、Bax、LC3、Beclin-1、p62、cleaved caspase-3以及Bcl-2蛋白表达。结果 与LPS组相比，银杏黄酮苷显著升高LC3荧光水平和MDC荧光强度，降低细胞凋亡率，上调NR4A2 mRNA和蛋白表达，下调p53、Bax mRNA和蛋白表达，提高了LC3、Beclin-1和Bcl-2蛋白表达，同时也降低了p62、cleaved caspase-3蛋白表达（P <0.05）; 3-MA自噬抑制剂的干预进一步验证银杏黄酮苷通过调控自噬，对LPS诱导的H9c2细胞凋亡具有保护作用。结论 银杏黄酮苷通过调控NR4A2/p53/Bax通路增强自噬通量，减轻LPS诱导的H9c2细胞凋亡，从而缓解心肌细胞损伤。

关键词

银杏黄酮苷 / H9c2细胞 / 自噬 / 细胞凋亡