蟾毒灵对肝细胞癌小鼠肿瘤微环境中乳酸脱氢酶A和调节性T细胞的影响

摘要

目的 检测乳酸脱氢酶A（LDHA）、FoxP3、CD4在肝细胞癌（HCC）中的表达，分析蟾毒灵对HCC小鼠肿瘤微环境中LDHA和调节性T细胞（Treg）分化及功能的影响。方法 采用免疫组织化学染色检测91例HCC患者癌组织和癌旁组织中LDHA和人Treg细胞特异分子标识FoxP3、CD4的表达差异及各指标间的相关性。应用C57BL/6小鼠构建Hep1-6皮下荷瘤模型。将小鼠随机分为对照组、蟾毒灵联合丙酮酸组、草氨酸盐组、蟾毒灵组，每组5只，比较皮下肿瘤的质量和体积。采用免疫组织化学染色检测各组小鼠肿瘤中LDHA和FoxP3、CD4的表达；采用ELISA检测各组小鼠血清中转化生长因子β（TGF-β）和白细胞介素-10（IL-10）水平，评估Treg细胞免疫功能。结果 与癌旁组织相比，人肝癌组织中LDHA和FoxP3高表达，CD4低表达（P<0.001）；相关分析结果显示，LDHA与FoxP3表达呈正相关，与CD4表达呈负相关（P<0.05）。Hep1-6皮下荷瘤小鼠实验结果显示，蟾毒灵组、草氨酸盐组肿瘤体积明显小于对照组，蟾毒灵联合丙酮酸组肿瘤体积明显大于蟾毒灵组（P<0.001）。免疫组织化学染色结果显示，蟾毒灵组和草氨酸盐组LDHA表达水平和FoxP3⁺细胞百分比明显低于对照组；蟾毒灵组CD4⁺细胞百分比明显高于对照组（P<0.001）；蟾毒灵联合丙酮酸组LDHA表达水平和FoxP3⁺细胞百分比明显高于蟾毒灵组，CD4⁺细胞百分比明显低于蟾毒灵组（P<0.001）。ELISA结果显示，蟾毒灵组、草氨酸盐组TGF-β和IL-10水平明显低于对照组（P<0.001）。结论 蟾毒灵可以抑制HCC小鼠肝癌细胞生长和增殖，下调LDHA表达，抑制Treg细胞分化和增殖。

关键词

肝细胞癌 / 蟾毒灵 / 调节性T细胞 / 乳酸脱氢酶A