miR-202-5p通过靶向抑制ROCK1表达减轻急性呼吸窘迫综合征新生大鼠肺损伤

摘要

目的 探讨miR-202-5p对急性呼吸窘迫综合征（ARDS）新生大鼠肺损伤的保护作用及其机制。方法 60只新生SD大鼠随机分为对照组（腹腔注射生理盐水）、ARDS组[腹腔注射脂多糖（4 mg/kg）建立ARDS模型]、ARDS+miR-NC组[ARDS大鼠尾静脉注射miR-NC(2 mg/kg),1次/4 h，连续干预12 h]、ARDS+miR-202-5p组[ARDS大鼠尾静脉注射miR-202-5p(2 mg/kg),1次/4 h，连续干预12 h]、ARDS+miR-202-5p+ov-NC组[ARDS大鼠尾静脉注射miR-202-5p(2 mg/kg),1次/4 h，连续干预12 h；脂多糖注射前3 d尾静脉注射6×10～8 PFU过表达对照腺病毒]和ARDS+miR-202-5p+ov-ROCK1组[ARDS大鼠尾静脉注射miR-202-5p(2 mg/kg),1次/4 h，连续干预12 h；脂多糖注射前3 d尾静脉注射6×10～8 PFU过表达ROCK1腺病毒]，每组10只。实时定量PCR检测大鼠肺组织中miR-202-5p和ROCK1 mRNA表达；HE染色观察大鼠肺组织病理损伤；计算大鼠肺组织湿重/干重比值来评价大鼠肺水肿程度；Western blotting检测大鼠肺组织中ROCK1、TLR4、p-NF-κB p65和p-IκBα蛋白表达。双萤光素酶报告基因实验验证miR-202-5p与ROCK1的关系。结果 miR-202-5p在ARDS大鼠肺组织中表达下调，过表达miR-202-5p可减轻ARDS大鼠肺组织病理损伤和肺水肿。ROCK1 mRNA在ARDS大鼠肺组织中表达上调；过表达miR-202-5p降低ARDS大鼠肺组织中ROCK1表达，而过表达ROCK1逆转了过表达miR-202-5p对ARDS新生大鼠肺损伤的保护作用。过表达miR-202-5p抑制ARDS大鼠肺组织中TLR4、p-NF-κB p65和p-IκBα蛋白表达，过表达ROCK1逆转此作用。双萤光素酶报告基因实验结果显示miR-202-5p靶向结合ROCK1 mRNA的3’UTR。结论 miR-202-5p通过靶向抑制ROCK1表达减轻ARDS大鼠肺损伤，其机制可能与抑制ROCK1介导的TLR4/NF-κB信号通路激活有关。

关键词

急性呼吸窘迫综合征 / miR-202-5p / ROCK1 / TLR4/NF-κB信号通路 / 肺损伤