异荭草素调节HMGB1-RAGE信号通路对脂多糖诱导的心肌细胞损伤的影响

摘要

目的 探究异荭草素（ISO）调节高迁移率族蛋白B1（HMGB1）-糖基化终末产物受体（RAGE）信号通路对脂多糖（LPS）诱导的心肌细胞损伤的影响。方法 采用LPS诱导H9c2细胞损伤，将细胞随机分为LPS诱导组（Model组，1μg/mL LPS）、低浓度ISO干预组（ISO-L组，50μmol/L ISO）、高浓度ISO干预组（ISO-H组，100μmol/L ISO）和高浓度ISO+RAGE激活剂晚期糖基化终末产物（AGES）组（ISO-H+AGES组，100μmol/L ISO+10μg/mL AGES），另设对照（Control）组。用CCK-8法检测H9c2细胞的活力。用流式细胞术检测H9c2细胞凋亡率。用ELISA试剂盒检测H9c2细胞中氧化应激相关因子超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）与谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平；ELISA法检测H9c2细胞炎性细胞因子白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和乳酸脱氢酶（LDH）水平。用Western blotting检测H9c2细胞HMGB1-RAGE信号通路与凋亡相关蛋白的表达水平。结果 与Control组相比，Model组H9c2细胞光密度（OD）₄₅₀（48 h、72 h）、SOD、GSH-Px、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）蛋白表达水平显著下降（P<0.05），细胞凋亡率、MDA、IL-1β、TNF-α和LDH水平、HMGB1、RAGE、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、cleaved caspase-3蛋白表达水平显著上升（P<0.05）。与Model组比较，ISO-L组、ISO-H组H9c2细胞OD₄₅₀（48 h、72 h）、SOD、GSH-Px、Bcl-2蛋白表达水平显著升高（P<0.05），细胞凋亡率、MDA、IL-1β、TNF-α和LDH水平、HMGB1、RAGE、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平显著下降（P<0.05）。AGES减弱了ISO对LPS诱导的H9c2细胞损伤的缓解作用。结论 ISO可能通过抑制HMGB-RAGE信号通路的过度激活减轻LPS诱导的心肌细胞损伤。

关键词

异荭草素 / 高迁移率族蛋白B1-糖基化终末产物受体信号通路 / 脂多糖 / 心肌细胞损伤