H₂S代谢基因3-MPST和SQOR在肺纤维化中的作用及其机制

摘要

目的 探讨硫化氢（H₂S）代谢基因3-巯基丙酮酸硫转移酶（3-MPST）和硫化物醌氧化还原酶（SQOR）在肺纤维化中的作用及其机制。方法 将40只SD大鼠随机分为对照组和模型组，分别在博来霉素处理后14和21 d取材，采用实时定量PCR和免疫组织化学法分析3-MPST和SQOR mRNA和蛋白在肺纤维化中表达的变化。将A549细胞随机分为对照组、TGF-β1组、TGF-β1+NaHS组、siRNA-3-MPST组、siRNA-3-MPST+TGF-β1组、siRNA-SQOR组和siRNA-SQOR+TGF-β1组。采用RNA干扰、实时定量PCR和Western blotting检测3-MPST、SQOR、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达的变化，检测各组A549细胞中H₂S和活性氧（ROS）水平的变化。结果 与对照组比较，模型组大鼠肺组织中3-MPST m RNA和蛋白表达水平降低，SQOR mRNA和蛋白表达水平升高（P<0.05）。与对照组比较，TGF-β1组A549细胞中E-cadherin和3-MPST m RNA和蛋白表达水平以及H₂S含量显著降低（P<0.05）,α-SMA和SQOR mRNA和蛋白表达水平以及ROS水平显著升高（P<0.05）。与TGF-β1组比较，TGF-β1+NaHS组上述变化减弱。与TGF-β1组比较，siRNA-3-MPST+TGF-β1组E-cadherin和SQOR mRNA和蛋白表达水平以及H₂S含量显著降低（P<0.05）,α-SMA mRNA和蛋白表达水平和ROS水平显著升高（P<0.05）;siRNA-SQOR+TGF-β1组α-SMA、3-MPST mRNA和蛋白表达水平以及ROS水平显著降低（P<0.05）,E-cadherin m RNA和蛋白表达水平和H₂S含量显著升高（P<0.05）。结论 3-MPST可能通过增加H₂S含量、降低ROS水平发挥抑制上皮-间质转化和肺纤维化的作用，而SQOR可能通过减少H₂S含量、提高ROS水平促进上皮-间质转化和肺纤维化。NaHS具有抑制上皮-间质转化和肺纤维化的作用。

关键词

肺纤维化 / 上皮-间质转化 / 3-巯基丙酮酸硫转移酶 / 硫化物醌氧化还原酶 / 硫化氢代谢