沉默NLRP3通过抑制细胞焦亡减轻胃溃疡小鼠的炎症反应

摘要

目的 探讨沉默NOD样受体家族结构域蛋白3(NLRP3)通过抑制细胞焦亡对胃溃疡小鼠炎症反应的调控作用。方法 将40只成年C57BL/6J雄性小鼠随机分为5组：对照组[静脉注射0.1 mL/10 g生理盐水联合灌胃（与模型组等体积）]、模型组（200mg/kg阿司匹林和0.2 mol/L盐酸的混合液灌胃，静脉注射0.1 mL/10 g生理盐水）、模型+siNLRP3阴性对照组（200 mg/kg阿司匹林和0.2 mol/L盐酸的混合液灌胃，静脉注射0.1 mg/kg siRNA阴性对照）、模型+siNLRP3组（200 mg/kg阿司匹林和0.2 mol/L盐酸的混合液灌胃，静脉注射0.1 mg/kg沉默NLRP3的siRNA重组质粒）、模型+siNLRP3+polyphyllinⅥ组（200 mg/kg阿司匹林和0.2 mol/L盐酸的混合液灌胃，静脉注射0.1 mg/kg沉默NLRP3的siRNA重组质粒和10 mg/kg polyphyllinⅥ），每组8只。每组注射1次/周，4周后取胃黏膜组织用于后续检测。采用Western blotting检测胃黏膜组织中NLRP3、白细胞介素（IL）-1β、IL-18、cleaved caspase-1/caspase-1比值、Gasdermin D(GSDMD)、CD86、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、CD206、IL-10的表达。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。结果 与对照组相比，模型组小鼠胃溃疡形成，溃疡指数增加，体重下降，NLRP3、IL-1β、IL-18、GSDMD的表达及cleaved caspase-1/caspase-1比值增加，血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平增加（均P<0.05）。与模型+siNLRP3阴性对照组比较，模型+siNLRP3组的小鼠胃溃疡症状改善，溃疡指数下调，体重增加，且胃黏膜组织中NLRP3、IL-1β、IL-18、GSDMD的表达及cleaved caspase-1/caspase-1比值均减少，血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低（均P<0.05）。与模型+siNLRP3组比较，模型+siNLRP3+polyphyllinⅥ组小鼠溃疡指数增加，体重下降，NLRP3、IL-1β、IL-18、GSDMD的表达及cleaved caspase-1/caspase-1比值增加（均P<0.05）。结论 沉默NLRP3通过抑制细胞焦亡，显著减轻胃溃疡小鼠的炎症反应，改善胃溃疡症状。NLRP3可能是治疗胃溃疡的潜在靶点。

关键词

NOD样受体家族结构域蛋白3 / 胃溃疡 / 细胞焦亡 / 炎症反应