自噬通过核受体共激活因子4调控代谢相关脂肪性肝病中肝细胞铁死亡的分子机制

摘要

目的 探讨自噬能否通过核受体共激活因子4(NCOA4)调控代谢相关脂肪性肝病（MAFLD）中肝细胞铁死亡。方法 使用1 mmol/L游离脂肪酸（FFA）干预L02肝细胞，建立MAFLD体外细胞模型，将L02肝细胞分为对照组、模型组和氯喹组。采用油红O染色以及甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）检测评估模型效果。采用Western blotting和实时定量PCR检测各组肝细胞中SLC7A11、GPX4、FTH1、TFR1、LC3B、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、ATG7、NCOA4的表达。将12只C57BL/6小鼠随机分为对照组（WT组）和模型组（HFCFD组），通过高脂肪/胆固醇/果糖饲料喂养建立小鼠MAFLD模型。采用免疫组织化学染色检测各组小鼠肝组织中LC3B、NCOA4、FTH1、SLC7A11的表达。结果 FFA干预后，肝细胞中脂滴聚集，TG、TC、AST、ALT含量增加（均P<0.0001）。与对照组相比，模型组肝细胞中SLC7A11、GPX4、FTH1表达水平降低（均P<0.05）,TFR1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、ATG7、NCOA4表达水平升高（均P<0.05）；与模型组相比，氯喹组肝细胞中SLC7A11、GPX4、FTH1表达水平降低（均P<0.05）,TFR1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、ATG7、NCOA4表达水平升高（均P<0.05）。与WT组相比，HFCFD组小鼠肝组织中LC3B、NCOA4表达水平升高（均P<0.05）,FTH1、SLC7A11表达水平降低（均P<0.05）。结论 自噬能通过抑制NCOA4蛋白表达，减少FTH1降解，进而抑制MAFLD中肝细胞铁死亡。

关键词

肝细胞 / 铁死亡 / 自噬 / 核受体共激活因子4 / 代谢相关脂肪性肝病