参苓白术散介导巨噬细胞极化影响肝细胞癌进展的分子机制

摘要

目的 探讨参苓白术散通过E1A结合蛋白p300/核因子E2相关因子2(Nrf2)通路调节巨噬细胞极化参与肝细胞癌（HCC）进展的分子机制。方法 建立HCC小鼠模型，分别给予参苓白术散、抗程序性死亡受体1(α-PD-1)抗体或二者联合治疗。观察肿瘤体积和重量变化，通过HE染色评估病理改变，免疫组织化学法检测巨噬细胞极化标志物诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和精氨酸酶1(Arg1)水平。用参苓白术散含药血清处理HepG2细胞，并与THP-1细胞共培养。采用CCK-8法、Transwell实验和TUNEL法评估细胞活力、侵袭能力和凋亡率，酶联免疫吸附试验检测THP-1细胞上清液中iNOS和Arg1浓度，Western blotting检测p300、Nrf2和Nrf2乙酰化水平。结果 HCC小鼠模型中，参苓白术散和α-PD-1单药显著抑制肿瘤生长，联合治疗效果更佳。免疫组织化学结果显示，参苓白术散和α-PD-1单药升高M1型巨噬细胞标志物iNOS水平并降低M2型巨噬细胞标志物Arg1水平，联合治疗效果更显著。体外实验表明，参苓白术散含药血清抑制HepG2细胞活力和侵袭能力，诱导细胞凋亡，升高THP-1细胞上清液中iNOS水平并降低Arg1水平。Western blotting结果显示，参苓白术散降低p300、Nrf2及其乙酰化水平，过表达p300能够逆转这些效应。结论 参苓白术散通过抑制p300介导的Nrf2乙酰化修饰，调节巨噬细胞极化，进而抑制HCC细胞生长。

关键词

参苓白术散 / 肝细胞癌 / 巨噬细胞极化 / 乙酰化