SLC7A5促进TGF-β1诱导的小鼠胚胎成纤维细胞活化和增殖

摘要

目的 探讨溶质载体家族7成员5(SLC7A5)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的小鼠胚胎成纤维细胞活化和增殖的作用。方法 小鼠胚胎成纤维细胞系NIH-3T3用TGF-β1孵育24 h，使用PCR阵列（PCR array）筛选靶基因。使用沉默慢病毒sh-SLC和重表达慢病毒r-SLC转染成纤维细胞。采用Western blotting和实时定量PCR检测目标靶点SLC7A5以及成纤维细胞活化指标α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、波形蛋白（Vim）和Ⅰ型胶原（COL-Ⅰ）合成；采用CCK-8法检测各组成纤维细胞的增殖速度；采用DCFH-DA探针和还原型谷胱甘肽检测试剂盒检测成纤维细胞内氧化还原状态。结果 与PBS组相比，TGF-β1组成纤维细胞中SLC7A5蛋白和基因表达水平均升高（P<0.05）。与未转染病毒对照组（Con组）相比，SLC7A5基因沉默组（sh-SLC组）成纤维细胞中α-SMA、Vim和COL-Ⅰ表达水平下降，增殖速度降低，谷胱甘肽含量减少，活性氧累积加重（P<0.05）；与sh-SLC组相比，重新表达SLC7A5基因组（r-SLC组）成纤维细胞中上述现象能够逆转。结论 SLC7A5促进TGF-β1诱导的小鼠胚胎成纤维细胞活化和增殖，并可能通过调节细胞内氧化应激状态发挥作用，SLC7A5有望成为纤维化疾病中抑制成纤维细胞活化和增殖的靶点。

关键词

溶质载体家族7成员5 / 转化生长因子β1 / 肾纤维化 / 成纤维细胞