鸡源大肠杆菌生物被膜形成与耐药性、毒力基因的关联性分析

摘要

旨在了解鸡源大肠杆菌临床分离株生物被膜形成能力与耐药性、毒力基因之间的关系。通过刚果红试验、结晶紫染色法测定生物被膜形成能力；采用微量肉汤稀释法检测分离株对阿莫西林、氟苯尼考、庆大霉素等8种抗菌药的耐药性；PCR检测常见耐药、毒力基因携带情况；采用实时荧光定量PCR检测毒力基因在生物被膜阳性菌中的表达量。结果表明，在51株分离株中，生物被膜阳性菌株比例为19.61%,阳性菌株中，OD_(600)最大值为2.233±0.702,最小值为0.374±0.099,其他介于1.455～1.604之间；耐药性检测显示，生物被膜阳性菌株对头孢喹肟、氟苯尼考、庆大霉素、阿米卡星、黏菌素的耐药率均高于阴性菌株，其中对阿米卡星和黏菌素差异显著(P<0.05),但对多西环素耐药率低于阴性菌株，差异显著(P<0.05),二者对阿莫西林+克拉维酸、恩诺沙星耐药率无差异；OD_(600)值最大的E13对8种测定药物全部耐药，6株OD_(600)值介于1.455～1.604的菌株对5种及以上抗菌药产生耐药性，OD_(600)值为0.374的菌株E39为敏感菌株。PCR结果显示耐药基因bla_(CTX-M-9)、bla_(CTX-M-U)、bla_(OXA-1)、mcr-1、rmtB、floR在生物被膜阳性菌株中的检出率高于阴性菌株，菌株E13同时携带9种耐药基因；共检出16种毒力基因，其中fimH、astA、aggR、irp1、iucD、fyuA、ybtA、ompA在生物被膜阳性菌株中的检出率高于阴性菌株，且阳性菌株毒力基因型复杂；以OD_(600)值为0.374的E39菌株为对照，OD_(600)值较大的生物被膜阳性菌株中，fimH、ompA、ompA、iucD、hlyF毒力基因表达呈现上调趋势。综上，与生物被膜阴性菌株相比，大肠杆菌生物被膜阳性菌株耐药更为严重，携带毒力基因型更加复杂多样，且毒力基因表达呈现上调趋势。

关键词

大肠杆菌 / 生物被膜 / 毒力基因 / 耐药基因 / 耐药性

基金资助

国家自然科学基金面上项目(32072914); 河南省重点研发项目(221111111300)