茶多酚对高温下猪睾丸间质细胞损伤及睾酮分泌异常的缓解作用

何芝凤; 李芳芳; 胡传活; 赵欢欢; 赵文婧; 黄明光

畜牧与兽医 ›› 2023, Vol. 55 ›› Issue (11) : 59 -64.

何芝凤, 李芳芳, 胡传活, 赵欢欢, 赵文婧, 黄明光

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摘要

旨在探究茶多酚(TP)对高温下猪睾丸间质细胞的凋亡及睾酮分泌的影响。通过酶消化与过筛法相结合的方式分离培养2～3周龄的仔猪睾丸间质细胞，分为空白组、热处理组和热+TP处理组。使用CCK8方法检测细胞存活率以筛选最适TP浓度；通过酶联免疫法(ELISA)检测热休克蛋白70(Hsp70)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、细胞色素C(Cytc)和睾酮的浓度；荧光定量PCR方法检测B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和Cytc、Caspase-3的mRNA表达水平；利用荧光探针DCFH-DA法测定细胞活性氧(ROS)水平。结果显示，与热处理组相比，TP处理后可明显提高细胞存活率(P<0.01),Bcl-2的mRNA表达水平显著升高(P<0.05),Bax、Cytc、Caspase-3的mRNA表达水平极显著降低(P<0.01),ROS水平极显著降低(P<0.01),Hsp70、Cytc、Caspase-3的蛋白含量极显著降低(P<0.01),睾酮分泌水平极显著升高(P<0.01)。由上可知，TP对高温下猪睾丸间质细胞的凋亡损伤和睾酮分泌功能异常具有明显的缓解作用。