禽腺病毒血清4型中国流行株fiber2蛋白单克隆抗体制备与鉴定

田开月; 曲信芹; 韩城昊; 尹坤; 杨盼盼; 黄玉波; 赵军

畜牧与兽医 ›› 2023, Vol. 55 ›› Issue (11) : 104 -109.

田开月, 曲信芹, 韩城昊, 尹坤, 杨盼盼, 黄玉波, 赵军

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摘要

旨在制备禽腺病毒血清4型(fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)中国流行株的fiber2蛋白的特异性单克隆抗体。以纯化的FAdV-4中国流行株CH/HNJZ/2015免疫BALB/c小鼠，取小鼠脾脏与SP2/0细胞融合，采用基于fiber2蛋白的间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞，经过5次亚克隆，获得2株分泌抗fiber2蛋白抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为2C3和7B4。以制备的2C3和7B4腹水进行亚型鉴定、反应原性、特异性以及中和活性测定。结果显示，成功制备了抗FAdV-4 fiber2蛋白的特异性单克隆抗体，获得的单克隆抗体均为IgM亚型，可特异性识别FAdV-4及其fiber2蛋白，为FAdV-4的免疫检测和fiber2蛋白功能研究提供了研究材料。