基于牛肠道病毒重组VP2蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立与应用

摘要

为了解牛肠道病毒(bovine enterovirus, BEV)在我国牛群中的感染情况，建立了基于BEV VP2蛋白的间接ELISA抗体检测方法。结果发现重组VP2蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中以可溶性形式表达。间接ELISA检测方法其抗原包被最佳浓度为100 ng/孔，最佳封闭条件是10%马血清封闭1.5 h,一抗最佳稀释度是1∶100,二抗最佳稀释度是1∶200。该方法具有良好的特异性、重复性和灵敏性，与间接免疫荧光方法相比较，符合率为92.3%。对全国7个不同省市的1 964份牛血清样本进行检测，显示总体阳性率为52.6%,表明BEV已在我国牛群中普遍流行。本试验建立的BEV抗体间接ELISA方法，为BEV感染的诊断和血清学调查提供了技术支撑。

关键词

牛肠道病毒 / VP2蛋白 / 原核表达 / 间接ELISA