丁香酚纳米脂质体的制备条件优化、表征及其体外抑菌效果

许书雅; 詹轶雯; 魏思敏; 田启明; 伯若楠; 刘明江; 李金贵

畜牧与兽医 ›› 2023, Vol. 55 ›› Issue (07) : 108 -117.

许书雅, 詹轶雯, 魏思敏, 田启明, 伯若楠, 刘明江, 李金贵

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摘要

为解决丁香酚易挥发、难溶于水和不稳定等问题，将其制备成丁香酚纳米脂质体(ENL),并检测其体外抑菌效果。采用薄膜水合超声法制备ENL,在单因素分析基础上以BBD响应面法优化制备工艺；对其形态、粒径、多分散指数(PDI)、体外释放等进行表征；以微量肉汤稀释法检测ENL对大肠杆菌的抑菌效果。ENL的最佳制备条件为：大豆卵磷脂与胆固醇的质量比5.4∶1、丁香酚浓度1.5%、超声时间10 min,包封率可达到(72.42±0.22)%。平均粒径大小为(203.97±8.66)nm, PDI为0.23±0.03,Zeta电位为(-2.18±0.18)mV,具有较好的分散性。透射电镜下，ENL形态近似球形；ENL中丁香酚的红外光谱特征峰消失，提示丁香酚被成功包裹到脂质体中；24 h内在胃肠模拟液中的累积释放量约为60%。30 d内在4℃和25℃两种储存情况下，ENL平均粒径大小及PDI变化不大，与丁香酚相比，ENL具有更好的稳定性。体外抑菌试验结果表明：ENL的抑菌效果比丁香酚增强2～4倍，其对大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)为0.31 mg/mL,该浓度可明显抑制大肠杆菌从生长期到对数期的进程；4 MIC处理4 min可杀灭参考株ATCC25922,10 min可杀灭临床分离耐药株AHM5C23;扫描电镜发现，ENL处理引起菌体发生皱缩和细胞膜破损。优化制备的ENL具有较好的均一性和分散性，方便使用，在胃肠模拟液中缓慢释放，且增强了丁香酚的抑菌效果。