鸭圆环病毒无核定位信号衣壳蛋白的原核表达及其在间接ELISA中的应用

摘要

鸭圆环病毒(DuCV)是一种具有长期免疫抑制特性的病原体，其Cap蛋白是DuCV的主要结构蛋白和主要免疫保护抗原，构成病毒的核衣壳，对DuCV的血清学诊断具有重要意义。为了开发出适合DuCV的检测方法，本研究在重组Rosetta大肠杆菌细胞内对无核定位信号的DuCV Cap蛋白进行了表达，建立了基于无核定位信号Cap蛋白检测DuCV血清抗体的间接ELISA方法(Cap-ELISA)。结果：Cap-ELISA包被抗原的最佳浓度为280 ng/孔，血清稀释比为1∶1 600;检测样本的阴阳临界值为0.339,灵敏度达到1∶12 800,并对DuCV抗体检测具有特异性；与常规PCR方法的符合率为92.7%,用Cap-ELISA对山东部分地区的樱桃谷鸭血清进行了间接ELISA检测，总阳性率为88.9%,说明该方法适合在DuCV血清学诊断中应用。

关键词

鸭圆环病毒 / 衣壳蛋白 / 原核表达 / 间接ELISA