细胞溶素HlyE变体对禽致病性大肠杆菌致病力的影响

摘要

为了探究细胞溶素HlyE突变体(HlyE-V)对禽致病性大肠杆菌(APEC)致病力的影响，采用Red同源重组法构建了APEC菌株CBE59的HlyE-V基因缺失株CBE59ΔHlyE-V和回补株CBE59CΔHlyE-V,测定缺失株生长曲线、溶血活性、胞内存活曲线，并用细胞毒性试验和动物试验来评估HlyE-V对APEC致病力的影响。结果表明∶缺失HlyE-V基因对APEC的生长速率影响较小，野生株、缺失株和回补株均无溶血活性，证明HlyE-V不是孔道形成毒素，不能溶解哺乳动物的红细胞；HlyE-V缺失株致细胞毒性和对雏鸡的致病力显著降低，缺失株的半数致死量(LD_(50))值为4.9×10~6CFU/只，而野生株和回补株的LD_(50)分别为8.2×10~5CFU/只、4.2×10~5CFU/只；在HD11巨噬细胞内的存活能力显著下降，在野生株CBE59感染的HD11中有一半的细胞中含有6～8个细菌，且有56.7%的细胞中观察到超过6个细菌；而在观察缺失株CBE59ΔHlyE-V时，菌量超过6个的仅为10.7%,相较野生株下降了46%。研究表明，HlyE-V对APEC的致病力起着关键作用。

关键词

禽致病性大肠杆菌 / 细胞溶素HlyE突变体 / 毒力 / 溶血素