盖塔病毒非结构蛋白NSP1多克隆抗体的制备及鉴定

摘要

试验旨在获得能够特异性识别盖塔病毒(Getah virus, GETV)非结构蛋白NSP1的抗体，用于鉴定NSP1蛋白及其分布。采用RT-PCR技术扩增GETV的非结构蛋白NSP1基因，构建了NSP1蛋白的原核表达质粒pET-NSP1,转化至大肠杆菌BL21(DE3)诱导大量表达。纯化原核表达的目的蛋白，免疫BALB/c小鼠，制备了NSP1蛋白的多克隆抗体，间接ELISA效价达1∶10~5以上。Western blot和免疫荧光试验(IFA)结果显示，NSP1蛋白多克隆抗体与GETV有良好的反应性。NSP1蛋白多克隆抗体的制备，为进一步研究该蛋白在盖塔病毒复制周期中的功能奠定了基础。

关键词

多克隆抗体 / NSP1基因 / 非结构蛋白 / 盖塔病毒