宁夏地区1株牛病毒性腹泻病毒2a亚型毒株的分离鉴定

摘要

为了解宁夏地区牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的分子流行病学现状及其N~(pro)基因的遗传变异情况，从宁夏某牛场疑似感染BVDV的9份牛血清中分离到1株可导致细胞发生病变的BVDV毒株，命名为BVDV NX-01,通过测定病毒滴度、电镜观察、病毒N~(pro)基因扩增及测序、绘制进化树、序列一致性比对等方法，对分离株进行鉴定及遗传进化分析。结果：该分离株接种MDBK细胞培养可产生明显的细胞病变，培养48 h病毒滴度达10~(7.0) TCID_(50)/0.1 mL,病毒粒子呈有囊膜的球形，直径40～60 nm;进化分析结果表明，BVDV NX-01与GS2018株有较近的亲缘关系，同属于BVDV-2a基因亚型；序列一致性比对发现，BVDV NX-01与进化树中处于同一分支的GS2018株N~(pro)基因一致性高达98.9%,进一步说明分离株BVDV NX-01属于BVDV-2a亚型。本研究结果不仅丰富了宁夏地区BVDV的分子流行病学数据，也为从分子水平研究BVDV的致病机理提供一定的理论依据。

关键词

牛病毒性腹泻病毒 / 基因亚型 / 分离 / 鉴定