猪链球菌WapA毒素功能鉴定

摘要

胞壁相关蛋白A(WapA)广泛存在于革兰阳性菌中，在细菌致病过程中发挥重要作用。为探究WapA的致病机制和致病作用，本研究对猪链球菌WUSS351株基因组进行分析，发现了2个编码WapA毒素的基因簇，编码的毒素分别命名为WapA1和WapA2,在GenBank数据库中检索到更多的WapA1和WapA2同源体，通过对它们的C端和N端结构域的系统进化分析，发现猪链球菌中广泛存在编码该毒素的基因簇，提示其可能具有重要的功能。后续通过构建多个WapA毒素的pBAD-His和pBAD-pleB重组质粒在大肠杆菌中表达WapA,结合生长曲线与活菌计数结果发现，WapA1-1对大肠杆菌具有周质毒性，而WapA1-2、WapA1-3、WapA2-1、WapA2-3对大肠杆菌具有胞质毒性，初步确定了WapA的毒性作用。进一步构建wapA1-1、wapA1-2、wapA2-1、wapA2-3基因缺失株(ΔwapA1-1、ΔwapA1-2、ΔwapA2-1、ΔwapA2-3),并通过竞争试验和动物感染试验发现，WapA可介导猪链球菌WUSS351株的竞争生长，并在猪链球菌致病过程中发挥重要作用。本研究结果对于猪链球菌的致病机理研究具有指导意义，为后续疾病治疗和预防提供参考。

关键词

猪链球菌 / WapA / 毒性 / 致病力