口岸快速筛查鲤春病毒血症病毒的超敏量子点荧光免疫层析检测方法的建立

摘要

鲤春病毒血症病毒(SVCV)的糖蛋白(G)是最主要的表面抗原，能够诱导机体产生中和抗体，常用作该病毒的免疫诊断抗原。将SVCV G蛋白免疫小鼠，通过杂交瘤细胞技术制备得到G蛋白的单克隆抗体，在此基础上，采用EDC共价偶联标记法将抗体与羧基功能化荧光量子点进行偶联标记，制备成超敏荧光量子点免疫层析快速检测卡。通过建立的SVCV G蛋白超敏荧光量子点免疫层析快速检测体系，检测SVCV G蛋白灵敏度可达到0.1 ng/mL,检测时间为10 min。检测金鱼造血器官坏死病毒(GFHNV)、病毒性神经坏死病病毒(VNNV)、病毒性出血败血症病毒(VHSV)、狗鱼幼鱼弹状病毒(PFRV)结果均为阴性，无交叉反应，检测SVCV培养液和鱼类内脏组织样本与实时荧光RT-PCR结果相符合。结论：SVCV抗原超敏荧光量子点免疫层析快速检测卡能达到快速简便、敏感特异的要求，适用于口岸需要提高通关效率的水产品(即检即放)快速筛查，可用于现场诊断及监测防控鲤春病毒血症。

关键词

鲤春病毒血症病毒 / 糖蛋白 / 荧光免疫层析 / 快速筛查

基金资助

深圳市科技计划项目(专2022N020); 广东省口岸安全智能化检测重点实验室项目(2023B1212020011)