褪黑素改善绵羊冷冻卵母细胞损伤与发育潜能的研究

摘要

为研究褪黑素（MLT）对绵羊GV期卵母细胞玻璃化冷冻效果的影响，选取具有3层以上致密完整卵丘细胞且胞质均匀的卵丘-卵母细胞复合体，在玻璃化冷冻解冻液中添加不同浓度(0、10^-11、10^-9、10^-7、10^-5 mol/L)MLT,解冻后检测体外成熟液培养24 h后卵母细胞以及新鲜组卵母细胞活性氧（ROS）、Ca²⁺、线粒体膜电位（MMP）水平。结果：与新鲜组相比，0 mol/L MLT组ROS、Ca²⁺水平显著升高（P<0.05）,MMP水平显著降低（P<0.05）;相较于0 mol/L MLT组，在玻璃化冷冻解冻液中添加MLT可显著降低绵羊玻璃化卵母细胞ROS和Ca²⁺水平（P<0.05）,并显著提升卵母细胞MMP水平（P<0.05）,其中绵羊GV期卵母细胞玻璃化冷冻过程中MLT的最适添加浓度为10^-9 mol/L;与0 mol/L MLT组相比，10^-9 mol/L组可显著提高卵母细胞体外受精后卵裂率（68.64%vs 58.03%,P<0.05）与囊胚率（18.97%vs 5.96%,P<0.05）。本研究证实在玻璃化冷冻解冻液中补充MLT可缓解绵羊GV期卵母细胞冷冻损伤并提高其发育潜能。

关键词

绵羊 / 卵母细胞 / 褪黑素 / 玻璃化

基金资助

国家重点研发计划项目(2021YFD1200401); 河北省自然科学基金联合基金项目(C2023204007); 河北省教育厅重点项目(ZD2022005); 河北省留学回国人才项目(ZD20220513); 河北农业大学人才引进专项项目(YJ2021013)