猪萨佩罗病毒VP4蛋白多克隆抗体制备及功能验证

钟祖昌; 李本强; 陶洁; 程靖华; 石迎; 刘佩红; 唐攀; 焦嘉杰; 刘惠莉

畜牧与兽医 ›› 2025, Vol. 57 ›› Issue (04) : 78 -84.

钟祖昌, 李本强, 陶洁, 程靖华, 石迎, 刘佩红, 唐攀, 焦嘉杰, 刘惠莉

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摘要

为深入揭示猪萨佩罗病毒(porcine sapelovirus, PSV)致病机制，以毒株SHCM2019为研究对象，原核表达VP4蛋白并制备多克隆抗体。根据VP4氨基酸序列进行PSV遗传进化分析，然后将VP4基因与原核表达载体连接，经诱导表达得到可溶性VP4蛋白。纯化后的VP4蛋白免疫BALB/c小鼠，制备多克隆抗体并进行ELISA、Western blot、间接免疫荧光试验(IFA)验证其反应性。ELISA结果显示，多克隆抗体效价达1∶128 000;Western blot和IFA结果表明，其能特异性识别和结合PSV,说明重组VP4蛋白具有较好的免疫原性和反应原性。本研究成功表达了VP4蛋白并制备了多克隆抗体，为VP4蛋白功能研究奠定基础。