胆碱对奶牛肝脏细胞脂滴形成的影响及机制研究

摘要

旨在探讨胆碱缺乏和补充胆碱对奶牛肝细胞脂滴形成的影响及其机制。试验用50μmol/L的非酯化脂肪酸(non-esterified fatty acids, NEFA)处理奶牛肝细胞24 h,建立肝细胞脂滴积聚模型；在缺乏胆碱时及使用不同浓度胆碱对细胞进行处理，采用油红O染色观察细胞脂滴的大小和数量的变化，薄层色谱法测定磷脂含量，Western blot检测细胞自噬相关蛋白表达水平。结果：在胆碱缺乏培养基中，肝细胞的脂滴含量和直径显著增大，添加15、30和60μmol/L胆碱后，脂滴的大小随着胆碱浓度的增加而逐渐减小，脂滴平均直径分别为1.98、1.68和1.54μm;与对照组相比，磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺的含量随胆碱浓度的增加而显著升高(P<0.05);补充胆碱可激活奶牛肝细胞自噬，自噬标志物LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白比例显著升高，P62蛋白的表达水平显著降低(P<0.05)。综上，缺乏胆碱可引起奶牛肝细胞脂滴直径增大，而补充胆碱可逆转脂滴的这一表型，细胞磷脂和自噬可能在其中发挥调控作用。

关键词

奶牛 / 肝细胞 / 胆碱 / 脂滴 / 自噬