豌豆活性肽对猪流行性腹泻病毒复制的体外抑制作用

摘要

旨在研究豌豆活性肽对猪流行性腹泻病毒（PEDV）复制的体外抑制作用。合成豌豆活性肽KYGPTPVRDGFK,采用CCK-8试验测定该豌豆活性肽在12.5、25、50、100、200μmol/L浓度下对Vero细胞的毒性，将只含DMEM培养基、不含Vero细胞的样品设置为空白对照组，将含DMEM培养基和Vero细胞的样品设置为未添加豌豆活性肽组，将含有Vero细胞和豌豆活性肽的样品设置为添加豌豆活性肽组，通过病毒拷贝数、Western blot、半数组织培养感染量(TCID₅₀)测定该豌豆活性肽对PEDV在Vero细胞中复制的抑制作用，进一步采用Western blot分析该豌豆活性肽对PEDV生命周期的作用。结果：与对照组相比，该豌豆活性肽在12.5～200μmol/L浓度范围内对Vero细胞活性无显著性影响（P>0.05）;200μmol/L豌豆活性肽处理Vero细胞后，PEDV感染细胞病毒拷贝数、N蛋白灰度值和TCID₅₀值均显著低于对照组（P<0.05）;Western blot分析表明，该豌豆活性肽可以促进PEDV吸附和入侵到Vero细胞（P<0.05）,而抑制作用主要发生在病毒复制阶段（P<0.05）,对于病毒释放无显著作用。Western blot分析表明，该活性肽主要通过抑制内质网氧化还原酶（ERO1a）表达抑制PEDV复制。本研究为新型抗PEDV小分子的研制提供了思路。

关键词

豌豆活性肽 / 抗病毒 / 吸附 / 入侵 / 复制