猪细小病毒2型VP2蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

摘要

旨在制备猪细小病毒(PPV)VP2的多克隆抗体，并进行其检测能力验证。将PPV VP2克隆至原核表达载体pCold-TF,由1 mmol/L IPTG诱导得到VP2蛋白；纯化后VP2蛋白免疫新西兰大白兔，制备多克隆抗体并进行ELISA、Western blot、间接免疫荧光试验(IFA)验证其反应性。ELISA检测结果显示，多克隆抗体效价达1∶128 000;Western blot和IFA分析表明，其能特异性识别和结合PPV,说明重组VP2蛋白具有较好的免疫原性和反应原性。本研究为VP2血清学检测方法的建立及其蛋白的功能研究提供了材料。

关键词

猪细小病毒 / VP2蛋白 / 多克隆抗体 / 原核表达

基金资助

国家重点研发计划项目(2022YFD1800800,2021YFD1801401); 上海市自然科学基金项目(21ZR1476900); 国家自然科学基金项目(32373050,32072861); 中国农业科学院科技创新工程项目(CAAS-CSLPDCP-202402); 上海市兽医生物技术重点实验室开放基金项目(BD1500010)