猪细小病毒2型VP2蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

帅文娜; 李佳乐; 郭子强; 罗梦; 李丽薇; 周艳君; 姜一峰; 童武; 童光志; 李兆龙; 高飞

畜牧与兽医 ›› 2025, Vol. 57 ›› Issue (08) : 78 -84.

帅文娜, 李佳乐, 郭子强, 罗梦, 李丽薇, 周艳君, 姜一峰, 童武, 童光志, 李兆龙, 高飞

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摘要

旨在制备猪细小病毒(PPV)VP2的多克隆抗体，并进行其检测能力验证。将PPV VP2克隆至原核表达载体pCold-TF,由1 mmol/L IPTG诱导得到VP2蛋白；纯化后VP2蛋白免疫新西兰大白兔，制备多克隆抗体并进行ELISA、Western blot、间接免疫荧光试验(IFA)验证其反应性。ELISA检测结果显示，多克隆抗体效价达1∶128 000;Western blot和IFA分析表明，其能特异性识别和结合PPV,说明重组VP2蛋白具有较好的免疫原性和反应原性。本研究为VP2血清学检测方法的建立及其蛋白的功能研究提供了材料。