PRRSV MLV疫苗样毒株LY30的分离鉴定与致病性研究

摘要

旨在对采集的疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的临床病料进行病毒分离鉴定，并进行基因序列分析与致病性研究。针对猪场采集的疑似PRRS的病料，运用逆转录PCR(RT-PCR)技术进行检测，将检测为阳性的病料接种于非洲绿猴胚胎肾细胞(Marc-145)进行病毒分离，并采用间接免疫荧光(IFA)法进行鉴定；同时，对分离毒株的全基因组进行扩增与序列分析，进而通过感染仔猪探究其致病性。结果：经RT-PCR检测，临床病料猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)呈阳性，接种至Marc-145细胞后出现稳定的细胞病变；IFA试验呈现特异性荧光，表明成功分离到1株病毒，命名为LY30;测序结果显示，该病毒基因组全长为15 216 nt(不含polyA尾),与PRRSV MLV疫苗株、VR2332经典毒株核酸同源性分别达99.6%和99.3%,属于PRRSV MLV疫苗样毒株；将分离毒株LY30感染仔猪后，仔猪出现发热、咳嗽和食欲下降等临床症状，并伴有病毒血症和肺部组织病变，表明分离毒株LY30具有一定的致病性。综上，本研究从临床病料中分离到具有一定致病性的PRRSV MLV疫苗样毒株，对监测弱毒疫苗株临床使用的安全性及PRRS的防控具有重要意义。

关键词

猪繁殖与呼吸综合征病毒 / 分离鉴定 / 间接免疫荧光 / 基因组特征 / 弱毒疫苗