鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的双重PCR检测方法建立及其在海南文昌鸡主养区感染情况调查

摘要

皆在建立快速精准检测鸡毒支原体(MG)和鸡滑液囊支原体(MS)的双重PCR方法，并利用该方法检测分析海南文昌鸡主要养殖地区MG和MS感染现状及流行特点。针对MG mgC2基因和MS vlhA基因的保守序列，分别设计引物并合成，通过对反应条件及程序的优化，建立MG、MS双重PCR检测方法；对所建方法进行灵敏性、特异性及重复性验证，同时与国家农业行业标准进行比较，验证其准确性。应用所建方法对海南文昌鸡主要养殖地区采集的1 510份未免疫MG、MS疫苗的文昌鸡咽喉拭子进行病原学检测。结果显示：建立的双重PCR检测方法对MG、MS的最低检测限度均达到2.1×10～2拷贝/μL;与新城疫、马立克氏病、传染性法氏囊病和传染性喉气管炎等4种鸡常见病的病原不发生交叉反应；与国家农业行业标准发布的MG、MS单一PCR方法检测结果的符合率分别达到100%与98.83%;病原学检测结果显示，海南文昌鸡主要养殖地区MG的感染率为11.79%(95%CI:10.16%～13.42%),MS的感染率为25.96%(95%CI:23.75%～28.17%),MG和MS的混合感染率为7.42%(95%CI:6.10%～8.74%);MG和MS在春季高发，以中型规模养殖场和成年鸡感染情况最为严重，商品代肉鸡的阳性率最高。结果表明，本研究建立的MG、MS双重PCR检测方法具有良好的敏感性、特异性、稳定性和准确性，可应用于临床样本的检测；当前海南省文昌鸡主要养殖地区存在MG、MS感染，应加强防控。

关键词

鸡毒支原体 / 鸡滑液囊支原体 / 双重PCR / 病原学 / 文昌鸡