重组抗菌肽BMAP27-LL37对牛无绿藻的抗藻活性研究

摘要

旨在针对牛无绿藻对大多数抗生素不敏感的痛点，开发抗菌肽，为牛无绿藻感染导致的奶牛乳腺炎提供潜在治疗方案。通过构建pET-32a-BMAP27-LL37重组质粒，经IPTG诱导表达后获得重组抗菌肽BMAP27-LL37;通过体外抑菌试验、最小抑菌浓度测定，评价该抗菌肽对牛无绿藻的体外抑制效果；建立小鼠牛无绿藻乳腺炎模型，通过乳腺组织HE染色、乳腺组织菌落计数和白细胞介素1β、白细胞介素6及肿瘤坏死因子α的mRNA表达量测定，评价该抗菌肽在小鼠牛无绿藻乳腺炎的治疗效果。结果：体外试验中，重组抗菌肽BMAP27-LL37抑菌圈直径达4.0 cm,最小抑菌浓度为3.875μg/mL,表明其在体外对牛无绿藻具有良好的抑制作用。在小鼠试验中，重组抗菌肽BMAP27-LL37治疗组的小鼠乳腺组织HE染色切片显示，乳导管及腺泡周围结缔组织增生的病理变化程度显著弱于未治疗的感染组；治疗组乳腺组织菌落计数极显著低于感染组(P<0.01);实时荧光定量PCR结果显示，治疗组小鼠乳腺组织中炎性因子白细胞介素1β和白细胞介素6的mRNA表达量较感染组均显著下降(P<0.05)。综上，本研究表明重组抗菌肽BMAP27-LL37在体内外均有良好的抑藻效果，有望为牛无绿藻奶牛乳腺炎的治疗提供新思路。

关键词

牛无绿藻 / 抗菌肽 / BMAP27-LL37 / 抑藻活性