马链球菌兽疫亚种BifA蛋白的表达及增强血脑屏障通透性活性评价

摘要

BifA蛋白源自马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi ssp. zooepidemicus,SEZ)高致病力菌株，该蛋白已被证实能够促进SEZ穿透血脑屏障。为了高效表达BifA蛋白并评价BifA的生物学活性和功能，本研究基于不同载体(包括pGEX和p Cold I)构建了BifA蛋白的原核表达系统，使用IPTG诱导蛋白表达并纯化，成功获得纯化后的BifA-GST和BifA-His重组蛋白。分别将2种BifA重组蛋白以10μg尾静脉注射C57BL/6小鼠，并以10μg/m L处理人脑微血管内皮细胞(h BMEC)，结果表明2种BifA重组蛋白对小鼠和细胞均无毒性作用。通过构建体外血脑屏障模型评价2种表达系统获取BifA蛋白的生物学活性，结果表明BifA-GST蛋白不具有增强血脑屏障通透性的能力，而复性后的BifA-His蛋白在48 h内具有增强体外血脑屏障通透性的能力。综上，本研究建立了能够高效表达有增强血脑屏障通透性活性BifA蛋白的原核表达体系，为深入研究其作为增强血脑屏障通透性药物提供了重要的材料基础。

关键词

马链球菌兽疫亚种 / BifA蛋白 / 原核表达 / 增强血脑屏障通透性