PRRSV全病毒包被抗原间接ELISA抗体检测方法的建立与应用

摘要

为了提高猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体检测方法准确性，本研究采用分子筛方法和超速离心法制备PRRSV全病毒纯化抗原和Marc-145细胞模拟抗原，SDS-PAGE与Western blot结果显示，PRRSV全病毒纯化抗原主要包含M蛋白和N蛋白，细胞模拟抗原不与PRRSV抗体发生反应。通过反应条件优化，建立了PRRSV间接ELISA抗体检测方法，阴阳性抗体判定标准S/P临界值为0.4，敏感性96.47%，特异性96.36%。该方法与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和伪狂犬病病毒(PRV)等均无交叉反应性。批内和批间变异系数均低于10%。采用788份猪临床血清样品进行比对检测，该方法与间接免疫荧光试验(IFA)相比，Kappa值为0.91，而与IDEXX商品化试剂盒相比，Kappa值为0.72。上述结果表明，该方法敏感性高，特异性强，重复性好，是一种潜在的可用于PRRSV抗体检测、流行病学调查和疫病净化的方法。

关键词

猪繁殖与呼吸综合征病毒 / ELISA / 全病毒抗原