猪萨佩罗病毒3D蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

摘要

旨在制备猪萨佩罗病毒(PSV)3D蛋白的多克隆抗体。本研究通过扩增PSV 3D基因，构建重组原核表达质粒pET-30a-3D,将重组质粒转化至大肠杆菌BL21诱导表达，将诱导后表达的3D蛋白纯化，免疫兔制备了抗PSV 3D的多克隆抗体。结果：经SDS-PAGE和Western blot分析确认，所表达的3D蛋白质分子量大约为56 ku,与预期大小相吻合；将纯化后的重组蛋白3D免疫兔，制备了兔抗3D蛋白多克隆抗体。酶联免疫吸附试验显示，兔源3D蛋白抗体的效价高达1∶100 000以上；间接免疫荧光和Western blot试验结果所示，该抗体对PSV感染过程中表达的3D蛋白具有良好的反应性。综上，本研究成功制备抗3D多克隆抗体，为后续的PSV-3D蛋白功能探索及病原诊断提供了材料。

关键词

猪萨佩罗病毒 / 3D蛋白 / 原核表达 / 多克隆抗体