AFB1介导IPEC-J2细胞氧化应激模型的建立及抗氧化中药的筛选

摘要

旨在探讨构建黄曲霉毒素B1(AFB1)诱导猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)氧化应激损伤模型的最佳条件，并筛选出具有显著抗氧化功效的中药。以不同浓度的AFB1处理IPEC-J2细胞不同时间，通过评估细胞形态学、细胞活性、活性氧(ROS)水平、抗氧化酶活性，以及B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达，确定诱导氧化应激的最佳条件。同时以缓解氧化应激为筛选指标，对8种中药进行抗氧化性能和细胞存活率的检测。结果：与对照组相比，16μmol/L AFB1处理IPEC-J2细胞24 h, ROS水平显著升高(P<0.01),过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著降低(P<0.05),细胞存活率显著下降(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2显著下调(P<0.05)。8种中药预处理IPEC-J2细胞24 h,桔梗醇提物、灵芝多糖、平菇多糖和山楂多糖可部分缓解AFB1引起的细胞形态损伤；其中，灵芝多糖和平菇多糖预处理后，细胞存活率和SOD、CAT和GSH-Px活性显著升高(P<0.01),平菇多糖效果最优。综上，AFB1诱导IPEC-J2细胞氧化应激损伤模型的最佳条件为16μmol/L AFB1处理24 h,平菇多糖抗氧化性能较为理想。本研究为深入解析AFB1诱导肠道氧化损伤机制提供了可靠模型，也为开发新型功能性动物饲料添加剂及防治肠道氧化应激相关疾病奠定基础。

关键词

IPEC-J2细胞 / AFB1 / 氧化应激模型 / 中药

基金资助

江苏农林职业技术学院青年扶持项目(2021kj24); 2025年甘肃省高校研究生“创新之星”项目(2025CXZX-770)