猪圆环病毒2型Cap蛋白、猪链球菌2型、副猪格拉菌(4型+5型)三联灭活疫苗抗原配比研究

摘要

为研究用于预防猪呼吸道疾病综合征(PRDC)部分病原体的多联多价灭活疫苗抗原最佳配比，以大肠杆菌表达的猪圆环病毒2型(PCV2) Cap蛋白(2d基因型)、猪链球菌2型(SS2)、副猪格拉菌(GPS) 4型及5型菌株灭活菌体作为抗原，先验证各抗原配制成单苗的最小免疫剂量，然后将最小免疫剂量及其2倍剂量组合成6种不同配比的联苗免疫猪只进行效力评估。结果:PCV2 Cap蛋白、SS2 S2133株、GPS 4型(H4-131株)和5型(H5-58株)的最小免疫剂量分别为50μg、1×10～9CFU、2.0×10～9CFU和2.0×10～9CFU;联苗免疫效果评估显示，各抗原之间无显著拮抗作用或协同作用;二免后28 d，以最小免疫剂量组制备的疫苗，可使免疫组中多数猪只(4/5) PCV2中和抗体效价≥1∶32,SS2免疫攻毒4/5保护，GPS 4型和5型微量凝集抗体效价均表现为多数猪只(4/5)≥1∶16;经单因素方差分析，确定最佳疫苗配比为各抗原最小免疫剂量的2倍，该配比下猪只(5/5)二免后PCV2中和抗体效价提升至≥1∶64,GPS 4型和5型微量凝集抗体效价所有猪只(5/5)均提升至≥1∶32，与最小免疫量配比组相比抗体水平差异分别为显著(P<0.05)和极显著(P<0.01),SS2仍4/5保护。同时确认疫苗最佳乳化工艺为60～120 r/min搅拌30 min。综上，本研究为猪呼吸道多联疫苗的研发提供了关键数据支持。

关键词

PCV2 / SS2 / GPS4型 / GPS5型 / 抗原配比 / 三联灭活疫苗