鸡胚性腺分化过程中左右侧性腺原始生殖细胞数量的动态变化分析

摘要

旨在探究鸡胚性腺形态分化关键阶段，汉堡-汉密尔顿时期29～34(HH29～HH34)雌雄鸡胚左右性腺体细胞和原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)的数量差异，了解性腺分化和不对称发育在细胞水平的动态变化特征。分离胚胎性腺形态分化中E6(HH29)、E7(HH31)和E8(HH34)三个关键时期的广西麻鸡鸡胚左右侧性腺，通过实时荧光定量PCR对性腺PGCs进行标记基因表达水平鉴定，高碘酸希夫(PAS)糖原染色进行鉴定并统计左右侧性腺体细胞和PGCs数量以分析其差异。结果:从性腺中分离的PGCs显著高表达生殖细胞标记基因类无精症缺失基因(DAZL)和死盒解旋酶4(DDX4)(P<0.05)，且PAS糖原染色显示PGCs呈现紫红色，表明成功分离得到PGCs;细胞差异分析结果显示，雄性鸡胚左右侧性腺体细胞和PGCs在三个时期均无显著差异，与雄性性腺形态发育特征相符;雌性鸡胚中，右侧性腺体细胞和PGCs数量在HH29时呈现低于左侧的趋势，但差异不显著，与此时性腺形态开始分化特征一致;在HH31时期，雌性左右侧性腺体细胞和PGCs数量差异显著(P<0.05)，早于组织形态出现明显差异的HH34时，而胚胎发育至HH34时差异进一步扩大(P<0.01)。综上，本研究揭示了性腺中PGCs数量的动态变化，为解析不对称发育启动机制提供了新的时间框架与研究视角。

关键词

鸡胚性腺 / 原始生殖细胞 / 不对称发育 / 数量差异