基于网络药理学和转录组学探讨马齿苋抗猪流行性腹泻病毒的作用机制

摘要

旨在基于转录组学与网络药理学探讨马齿苋抑制猪流行性腹泻病毒(PEDV)复制的作用机制，并验证其关键活性成分。通过PEDV感染非洲绿猴肾(Vero)细胞模型，结合RNA-seq分析马齿苋处理后的差异表达基因，并进行功能富集；同时运用网络药理学筛选活性成分及靶点，构建蛋白互质网络(PPI)并鉴定核心基因，进行分子对接；通过体外试验检测马齿苋关键活性成分槲皮素对细胞毒性、病毒复制、乳酸脱氢酶(LDH)释放、三磷酸腺苷(ATP)合成及存活率的影响。结果显示，相较于病毒组，马齿苋处理组共鉴定出1 425个差异表达基因，其中584个回调基因，主要富集于肿瘤坏死因子(TNF)、凋亡及MAPK通路等。网络药理学得到10个活性成分及111个靶点，PPI确定表皮生长因子受体(EGFR)、雌激素受体1(ESR1)和肿瘤蛋白p53(TP53)等7个核心基因，其中槲皮素关联靶点最多且与核心靶点结合良好。体外证实槲皮素在19.3μg/mL以下无显著毒性，并能剂量依赖性地抑制LDH释放、ATP下降及病毒复制，提高细胞存活率。综上，马齿苋可能通过槲皮素等多成分协同调控凋亡与炎症通路发挥抗PEDV作用，为抗病毒药物研发提供依据。

关键词

马齿苋 / 网络药理学 / 转录组学 / 猪流行性腹泻病毒 / 活性成分

基金资助

国家自然科学基金项目(32302918,32302919); 国家重点研发项目子课题项目(2023YFD1800804-06); 山东省科技型中小企业创新能力提升工程项目(2023TSGC0006); 山东省重点研发计划项目(2023TZXD083)